段媛媛 , 罗孝荣 , 周武先 , 游景茂 , 郭晓亮 , 卢超 , 郭杰^*

湖北省农业科学院中药材研究所, 湖北省农业科技创新中心中药材研究分中心, 恩施, 445000
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 18 篇   
收稿日期: 2019年01月14日    接受日期: 2019年02月14日    发表日期: 2020年05月02日

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本研究采用均匀设计和单因素试验相结合的方法，探寻淫羊藿 ISSR-PCR 的各组分(即引物, 2伊TaqMaster Mix, 模板 DNA)的最佳用量及退火温度对 ISSR-PCR 扩增的影响，为进一步使用 ISSR 分子标记分析淫羊藿的遗传多样性提供科学依据。结果表明，筛选的最佳体系为：在 20 滋L 的体系中，模板 DNA 的量为 30 ng，2×Taq Master Mix 的量为 9.8 滋L，引物为 0.325 滋mol/L。此外，筛选出 7 条多态性较好、条带稳定的引物(UBC-808, UBC814, UBC826, UBC827, UBC840, UBC846 及 UBC856)，并对其进行温度梯度 PCR，结果表明，所选引物的最佳退火温度介于 46.8℃~65℃之间。在此基础上，对 13 份淫羊藿种质资源进行 ISSR 扩增验证，结果表明建立的最佳反应体系扩增效果较好，稳定性强，对淫羊藿的遗传多样性分析、鉴定等具有较好的应用价值。

淫羊藿；分子标记；ISSR；体系优化